這次的行動在20日的晚上護樹志工就開始接力守夜，並在現場工地貼上「敢動老樹、嚴辦工程」的貼紙，護樹志工隊他們得知移樹消息後是立刻發出動員；號召愛樹的民眾在21日早上能夠到現場關心，事實上在20日凌晨就有志工們摸黑爬上老樹守護，21日要移植的樹木總共還有26顆，不過志工指控在前一波的的移植過程中已經造成一死七重傷的情況，目前還在司法調查程序，因此他們對工務局的移植過程相當的質疑。
21日上午8點多，現場包商工程車、挖土機等車輛開進工地時，護樹志工衝向前阻擋施工機具進入，與警方發生多起推擠的衝突，最後警方以妨礙公務將涉嫌阻擋機具進入的3位護樹志工包含潘翰聲和王鍾銘等人架離現場，另一方面則繼續進行樹木移植的相關措施，大概在下午3:30將第1棵榕樹放在拖板車上運往三重集賢環保公園移植，最後工務局與滯留工地現場的民眾溝通，同意民眾留2位代表共同監督移樹過程，才讓首日移樹行動得以順利進行下去，當天總共移植了5顆老樹。
